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如何選擇酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)
如何選擇酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)
加入時(shí)間：2014-03-27 11:17:49 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：11188
酶標(biāo)儀的標(biāo)準(zhǔn)配置包括405nm,450nm,490nm及630nm四塊濾光片，具有紫外功能的酶標(biāo)儀還配備有340nm。
目前用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,最常使用的標(biāo)記用酶是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)，對(duì)應(yīng)的底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)。底物在過(guò)氧化氫溶液的存在下，經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌。
鄰苯二胺(OPD)的氧化產(chǎn)物DAB, 在pH值為5．0左右時(shí)，在450nm波長(zhǎng)處有最大吸收，此時(shí)可用450nm的濾光片測(cè)定吸光值。當(dāng)加入強(qiáng)酸作為終止試劑終止反應(yīng)時(shí)，pH值降到接近0，此時(shí)最大吸收波長(zhǎng)移至492 nm，此時(shí)可用492nm的濾光片測(cè)定吸光值。
四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌，一般在波長(zhǎng)為450nm處有最大消光系數(shù)。使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min，便于檢測(cè)。
 （普朗醫(yī)療品牌產(chǎn)品——酶標(biāo)分析儀9606）
因此，450nm和492 nm兩個(gè)波長(zhǎng)是目前ELISA測(cè)定最常用的。有的酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。
除了這兩個(gè)基本濾光片外，考慮到雙波長(zhǎng)比色的需要，還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片，雙波長(zhǎng)比色主要用于消除非特異干擾的影響。
如果一般醫(yī)院或是醫(yī)療器械單位實(shí)驗(yàn)室需要用酶標(biāo)儀作微量生化測(cè)定，就需要擴(kuò)展紫外檢測(cè)功能，此時(shí)需要一個(gè)340 nm波長(zhǎng)濾光片。
總之，以上介紹的是常用的幾個(gè)波長(zhǎng)的濾光片，用戶(hù)還可以根據(jù)自己的需求選擇其他波長(zhǎng)的濾光片。一般各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動(dòng)轉(zhuǎn)換的部件，可以同時(shí)安裝6～8片濾光片，可以滿(mǎn)足用戶(hù)的不同需求。 上一篇:
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