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微小殘留白血病的全自動血液細(xì)胞分析儀檢測和意義
加入時間:2012-01-09 08:55:49  當(dāng)前新聞點擊率:6765

    普朗醫(yī)療器械公司檢驗資訊 白血病初診時,通過全自動血液細(xì)胞分析儀對患者體內(nèi)的白血病檢測數(shù)量為1012~1013。誘導(dǎo)治療緩解后,雖然骨髓常規(guī)檢查時顯微鏡下已經(jīng)看不到白血病細(xì)胞了,但患者體內(nèi)的白血病細(xì)胞仍然有108~109,這就是微小殘留白血病(minimal residual disease, MRD)。所以白血病需要多次鞏固和強(qiáng)化治療以進(jìn)一步減少體內(nèi)白血病的數(shù)量。專家經(jīng)過全自動血液細(xì)胞分析儀研究表明,如果治療第33天的MRD能達(dá)10-4以下,今后復(fù)發(fā)的可能性就非常小了。如果MRD到第12周還在10-4以上,復(fù)發(fā)的可能性就較大。

    那么,如何檢測MRD呢?目前常用的方法有多種,對兒童白血病來說,主要有兩種方法:流式細(xì)胞學(xué)檢測和PCR方法檢測。美國St Jude兒童研究醫(yī)院主要采用流式細(xì)胞學(xué)檢測,而歐洲最大的兒童白血病協(xié)作組則主要采用PCR方法檢測。但不管用什么方法檢測,前提都必須是:在初診時需要通過全自動血液細(xì)胞分析儀找到該患者白血病細(xì)胞特有的標(biāo)志,打個比方,A患兒的白血病細(xì)胞有一個三角形的標(biāo)志,B患兒的白血病細(xì)胞有一個圓形的標(biāo)志,那么在今后的MRD追蹤檢測時,對A患兒就去找三角形的標(biāo)志,對B患兒就去找圓形的標(biāo)志。所以如果在初診時沒有確定該患兒特有的白血病標(biāo)志,那么在緩解后也就沒有辦法做MRD檢測了。

    大家看到這里,可能覺得“MRD檢測不難啊”。其實不然,白血病細(xì)胞絕不像我舉例的那么簡單,因為每個患者白血病細(xì)胞的特異標(biāo)志不盡相同,并且白血病細(xì)胞上還帶有很多正常細(xì)胞的標(biāo)志以逃脫機(jī)體的免疫監(jiān)視。所以如何通過全自動血液細(xì)胞分析儀確定白血病細(xì)胞特有的標(biāo)志最為關(guān)鍵。如果白血病細(xì)胞有特異的染色體易位或融合基因,那就相對比較容易確定和監(jiān)測。但兒童急淋白血病中,50%以上沒有染色體易位或融合基因,這就很難辦了。比如采用流式細(xì)胞學(xué)方法,首先要在初診時分析白血病細(xì)胞十幾種標(biāo)志,然后找出幾種標(biāo)志的特定組合作為該白血病細(xì)胞的特有標(biāo)志。

    需要說明的是,流式細(xì)胞學(xué)的檢測要求非常嚴(yán)格,我們醫(yī)院是專臺流式細(xì)胞儀專做MRD檢測,并且樣本制備過程中每一步都有嚴(yán)格的操作規(guī)范。如果醫(yī)院的常規(guī)免疫分型等其他檢測也用同一臺流式全自動血液細(xì)胞分析儀,那MRD的質(zhì)量就很難控制了。因為普通免疫分型的要求不高,只要非特異顆粒(污染細(xì)胞、雜質(zhì)或氣泡)控制在5%(即5×10-2)以下就不影響檢測結(jié)果,可對MRD來說,那就是天文數(shù)字了。還有,流式細(xì)胞學(xué)檢測與PCR檢測相比,主觀性要多一些,因為流式細(xì)胞學(xué)檢測MRD,一般需要選出4種抗體相互組合,而PCR檢測MRD一般就是單一的基因標(biāo)志。這樣問題就來了:流式細(xì)胞學(xué)的這些組合是否真的特異?也就是說由我們主觀分析出來的結(jié)果是否真的反映白血病細(xì)胞的客觀情況?

    雖然PCR檢測的客觀性強(qiáng)一些,但對它的要求也是非常高的,否則PCR的污染很難避免,因此與流式細(xì)胞學(xué)方法相比,PCR方法的假陽性比較高。

    由此可見,僅從全自動血液細(xì)胞分析儀檢測的層面看,MRD就還有很多的問題亟待解決。更為關(guān)鍵的是,我們?nèi)梭w是活的機(jī)體,各人還有個體差異。同樣一個數(shù)量級的MRD在A個體可能會造成復(fù)發(fā),在B個體可能就不復(fù)發(fā)。所以在分析一個檢測結(jié)果時(不僅僅是針對MRD),一定要結(jié)合孩子的具體情況才能做出最合理的分析判斷。

    文章來源--普朗醫(yī)療全自動五分類血液細(xì)胞分析儀廠家網(wǎng)編發(fā)表,轉(zhuǎn)載請注明出處。

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