加入時(shí)間：2012-01-09 09:37:58 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：8414
近年來(lái)，隨著多功能酶標(biāo)儀在國(guó)內(nèi)各高校實(shí)驗(yàn)室逐漸推廣開(kāi)來(lái)，多功能酶標(biāo)儀品牌和型號(hào)也逐漸多了起來(lái)，亂花漸欲迷人眼。除各品牌都有各自的一個(gè)甚至多個(gè)系列產(chǎn)品線，特性各不相同，選購(gòu)時(shí)各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標(biāo)令人眼花繚亂
本文嘗試從用戶(hù)實(shí)際使用的角度，探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性，希望能幫助大家找到真正合適自己的多功酶免檢驗(yàn)工作站。
一、濾片Vs光柵
多功能酶標(biāo)儀的分類(lèi)方法眾多，但最簡(jiǎn)單的莫過(guò)于用他們的濾光方式來(lái)作分界線。一般來(lái)說(shuō)，可以分為濾光片型和光柵型兩大類(lèi)。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè)，還是想用光柵的時(shí)候用光柵，該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可，另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類(lèi)儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
總體來(lái)說(shuō)，濾片技術(shù)由于發(fā)展已久，配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。目前常規(guī)多功能酶標(biāo)儀中最高的檢測(cè)靈敏度就是用濾光片型做出來(lái)的。 但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長(zhǎng)和數(shù)量限制，不可能滿(mǎn)足日益增加的實(shí)驗(yàn)類(lèi)型的檢測(cè)需要，而且有時(shí)需要對(duì)物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究，所以后來(lái)就誕生了光柵型的儀器。
光柵型酶標(biāo)儀的推陳出新，使得用戶(hù)在波長(zhǎng)選擇上不再受限，而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。這些都是目前濾光片型酶標(biāo)儀所不能或者較難實(shí)現(xiàn)的。
二、雜光率&波長(zhǎng)準(zhǔn)確性
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流，多家廠家共同努力，已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中，最關(guān)鍵的無(wú)疑就是光柵的雜光率和波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性了。
雜光率指得就是光源通過(guò)光柵后，得到的光線中，“不需要”的波長(zhǎng)的光占所標(biāo)稱(chēng)波長(zhǎng)的光的比例，表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性，無(wú)論使用濾光片還是光柵，雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。
一般來(lái)說(shuō)，濾光片型的雜光率在10-4～10-5之間，光柵型的可以做到10-6～10-7。由于此類(lèi)雜光是非特異的，而且會(huì)直接進(jìn)入最后的檢測(cè)器，所以有多少的雜光就會(huì)引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測(cè)過(guò)程中，由于檢測(cè)器存在放大效應(yīng)，雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級(jí)放大。因此，雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。
這兩個(gè)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)，直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測(cè)量的結(jié)果，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的最基本要求.
三、認(rèn)證>參數(shù)
在保證檢測(cè)可靠的基礎(chǔ)上，不同儀器的下一個(gè)差異就體現(xiàn)在檢測(cè)的靈敏度上面，這時(shí)人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測(cè)到多弱的信號(hào)。
靈敏度涉及了整個(gè)光路系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和選料，很難說(shuō)某一個(gè)部件會(huì)起決定性作用。但是有一點(diǎn)，在各種單功能檢測(cè)項(xiàng)目中，光吸收檢測(cè)用非放大型的光電二極管、熒光檢測(cè)用光電倍增管、發(fā)光檢測(cè)用專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的單光子計(jì)數(shù)光電倍增管，這三種不同的檢測(cè)器是各自檢測(cè)領(lǐng)域的優(yōu)先選擇。
各單項(xiàng)檢測(cè)的最優(yōu)結(jié)果都是用相應(yīng)檢測(cè)器完成的。當(dāng)然也有的儀器出于成本等考慮，用一個(gè)檢測(cè)器兼容多種檢測(cè)模式，這在一定程度上也能完成實(shí)驗(yàn)需求，但是在性能上也會(huì)有所犧牲折中，無(wú)法實(shí)現(xiàn)各項(xiàng)檢測(cè)都達(dá)到最優(yōu)化。
關(guān)于靈敏度的定義和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，每個(gè)廠家都有各自的描述，都會(huì)說(shuō)自己是怎樣怎樣好，很難有一個(gè)直觀的客觀比較。因此，某些試劑廠家就站了出來(lái)，對(duì)某些儀器的檢測(cè)性能提供一個(gè)第三方的認(rèn)證。
光柵型的儀器由于新技術(shù)近幾年才逐漸興起，受限于技術(shù)研發(fā)和儀器成本，同一個(gè)價(jià)格范圍內(nèi)的靈敏度等指標(biāo)會(huì)略差于發(fā)展成熟的濾光片機(jī)器。所以，在中檔多功能酶標(biāo)儀領(lǐng)域，拿到了各種認(rèn)證的光柵型儀器并不多見(jiàn)。
這說(shuō)明了光柵型酶標(biāo)儀的研發(fā)又進(jìn)入了一個(gè)新的高度，除了在靈活性上取得了無(wú)可替代的作用外，還在檢測(cè)靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型是科研領(lǐng)域多功能酶標(biāo)儀的未來(lái)主要發(fā)展趨勢(shì);而濾光片型儀器也正在往單項(xiàng)性能更優(yōu)的方面改進(jìn)。
四、比色杯+微量檢測(cè)
除了常規(guī)的6～384/1536孔酶標(biāo)板檢測(cè)之外，有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測(cè)板等的兼容功能。無(wú)論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測(cè)板，其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測(cè)引入一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測(cè)也能通過(guò)光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程O(píng)D值的換算，但這只是一個(gè)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過(guò)程，檢測(cè)誤差累積較多，實(shí)際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測(cè)板后，光吸收的檢測(cè)光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)度，OD值換算更加簡(jiǎn)單和準(zhǔn)確。附帶了此類(lèi)檢測(cè)功能的酶標(biāo)儀，相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測(cè)之外，還能替代部分分光光度計(jì)的功能，使其功能更加全面，儀器的性?xún)r(jià)比更高。
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