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如何挑選酶標儀
加入時間:2012-01-09 09:37:58  當前新聞點擊率:8414

       近年來,隨著多功能酶標儀在國內(nèi)各高校實驗室逐漸推廣開來,多功能酶標儀品牌和型號也逐漸多了起來,亂花漸欲迷人眼。除各品牌都有各自的一個甚至多個系列產(chǎn)品線,特性各不相同,選購時各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標令人眼花繚亂
  
       本文嘗試從用戶實際使用的角度,探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的多功酶免檢驗工作站

  
       一、濾片Vs光柵
  
       多功能酶標儀的分類方法眾多,但最簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說,可以分為濾光片型和光柵型兩大類。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測,還是想用光柵的時候用光柵,該用濾片的時候用濾片;還有一些實驗非用其中一個不可,另一模塊實現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
  
       總體來說,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以實現(xiàn)大部分實驗的需要。目前常規(guī)多功能酶標儀中最高的檢測靈敏度就是用濾光片型做出來的。 但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制,不可能滿足日益增加的實驗類型的檢測需要,而且有時需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進行研究,所以后來就誕生了光柵型的儀器。
  
  光柵型酶標儀的推陳出新,使得用戶在波長選擇上不再受限,而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。這些都是目前濾光片型酶標儀所不能或者較難實現(xiàn)的。
  
       二、雜光率&波長準確性
  
       光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,最關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準確性了。
  
       雜光率指得就是光源通過光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長的光占所標稱波長的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復雜性,無論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。

       一般來說,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會直接進入最后的檢測器,所以有多少的雜光就會引入多少的隨機誤差。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此,雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標。
       這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果,是實驗結(jié)果可靠性的最基本要求.

      三、認證>參數(shù)
  
       在保證檢測可靠的基礎(chǔ)上,不同儀器的下一個差異就體現(xiàn)在檢測的靈敏度上面,這時人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測到多弱的信號。
  
       靈敏度涉及了整個光路系統(tǒng)的設(shè)計和選料,很難說某一個部件會起決定性作用。但是有一點,在各種單功能檢測項目中,光吸收檢測用非放大型的光電二極管、熒光檢測用光電倍增管、發(fā)光檢測用專門設(shè)計的單光子計數(shù)光電倍增管,這三種不同的檢測器是各自檢測領(lǐng)域的優(yōu)先選擇。
  
       各單項檢測的最優(yōu)結(jié)果都是用相應(yīng)檢測器完成的。當然也有的儀器出于成本等考慮,用一個檢測器兼容多種檢測模式,這在一定程度上也能完成實驗需求,但是在性能上也會有所犧牲折中,無法實現(xiàn)各項檢測都達到最優(yōu)化。
  
       關(guān)于靈敏度的定義和檢測標準,每個廠家都有各自的描述,都會說自己是怎樣怎樣好,很難有一個直觀的客觀比較。因此,某些試劑廠家就站了出來,對某些儀器的檢測性能提供一個第三方的認證。
    光柵型的儀器由于新技術(shù)近幾年才逐漸興起,受限于技術(shù)研發(fā)和儀器成本,同一個價格范圍內(nèi)的靈敏度等指標會略差于發(fā)展成熟的濾光片機器。所以,在中檔多功能酶標儀領(lǐng)域,拿到了各種認證的光柵型儀器并不多見。

       這說明了光柵型酶標儀的研發(fā)又進入了一個新的高度,除了在靈活性上取得了無可替代的作用外,還在檢測靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標儀。光柵型是科研領(lǐng)域多功能酶標儀的未來主要發(fā)展趨勢;而濾光片型儀器也正在往單項性能更優(yōu)的方面改進。
  
       四、比色杯+微量檢測
  
       除了常規(guī)的6~384/1536孔酶標板檢測之外,有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測板,其目的都是給光程不固定的酶標板檢測引入一個標準光程的概念。雖然酶標板檢測也能通過光程校正等方式實現(xiàn)10mm光程OD值的換算,但這只是一個數(shù)學轉(zhuǎn)換過程,檢測誤差累積較多,實際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測板后,光吸收的檢測光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標準長度,OD值換算更加簡單和準確。附帶了此類檢測功能的酶標儀,相當于除了本身的多功能酶標檢測之外,還能替代部分分光光度計的功能,使其功能更加全面,儀器的性價比更高。

  

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