普朗醫療資訊 HLA抗體的臨床檢測方法
加入時間:2012-01-31 09:28:45 當前新聞點擊率:5232
普朗醫療資訊 上面小編已經為大家介紹過了HLA抗體的臨床研究意義,接下來,就為大家簡單的闡述一下HLA抗體的檢測方法和應用。
HLA抗體的檢測方法
1 微量淋巴細胞毒實驗(CDC):該實驗是由美國洛杉磯加州大學的Paul。Terasaki教授于1964年創建。主要原理是淋巴細胞具有HLA抗原,HLA抗體能結合到帶有相應抗原的淋巴細胞膜上,補體可以結合并在淋巴細胞膜上使其死亡。如果淋巴細胞不帶有相應的抗原,則無此作用。通過染色來觀察細胞是否死亡來確定相應的抗原或抗體。該方法可迅速檢測患者的HLA抗體,但需要分離細胞,抗原用量大且敏感性不高,多年來在臨床廣泛應用。
2 酶聯免疫法(EL ISA):該實驗的基本原理是將HLA抗原包被在一個孔內,將患者血清加入孔中與孔內的HLA抗原反應,通過酶作用使其顯色,并利用酶標儀進行檢測觀察,用熒光儀根據吸收光的不同來判斷結果。這種方法無需分離細胞,敏感性也有所提高,無需專門儀器設備,同時可檢出HLA-I類和HLA-II類抗體。但該方法操作繁瑣,也較費時,一次只能檢測一個指標,因此臨床應用受到一定限制。
3 流式細胞儀法(F lowCy tom e t ry)及單抗原磁珠法(LuminexTMFlow Cytometry):這兩種方法的基本原理都是將HLA單價抗原包被在不同顏色的微磁珠表面,用被檢測血清與磁珠反應,血清中HLA特異性抗體便與包被在磁珠上的抗原結合,然后再與標記PE的二抗孵育。根據熒光強弱通過流式細胞儀檢測出與這些磁珠對應的HLA抗體。這兩種方法在酶聯免疫法的基礎上使敏感性明顯提高,排除其它非反應抗原的干擾,可準確確定HLA抗體的特異性。單抗原磁珠法(L um inexTMF lowCy tom e t ry)在普通流式細胞儀基礎上進一步改進,并通過分析軟件的更新,對于較弱的反應抗體也能準確檢出。
展 望
HLA抗體與輸血,妊娠,疾病等的相關性正受到關注,國內HLA抗體檢測越來越多的被應用,相信隨著血液分析儀研究的深入,許多未知的問題會得到解決。