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    酶標(biāo)儀的功能及正確使用方法
    加入時(shí)間:2019-05-06 16:06:48  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2952
       作為微孔板比色計(jì)的酶標(biāo)儀,其基本功能不外乎一個(gè)比色測(cè)定,所不同的是在測(cè)定波長(zhǎng)范圍、吸光度范圍、光學(xué)系統(tǒng)、檢測(cè)速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測(cè)定軟件功能等方面的差異,當(dāng)然全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)還具有自動(dòng)洗板、溫育、加樣等功能。在臨床實(shí)驗(yàn)室實(shí)際工作中,實(shí)驗(yàn)人員在使用酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定操作時(shí),有時(shí)難免會(huì)對(duì)酶標(biāo)儀的一些性能指標(biāo)產(chǎn)生迷惑,甚至對(duì)酶標(biāo)儀的應(yīng)用產(chǎn)生錯(cuò)誤的理解。如諸如使用酶標(biāo)儀較用肉眼觀察測(cè)定的陽(yáng)性率明顯增加這樣的問(wèn)題。下面醫(yī)療器械生產(chǎn)廠家小編為大家詳細(xì)介紹一下。
    酶標(biāo)分析儀
       一、測(cè)定波長(zhǎng) 一般酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)在400~750nm或800nm之間,完全可以滿足ELISA的顯色測(cè)定。酶標(biāo)儀有單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)檢測(cè)功能有時(shí)使用者不知在什么情況下使用單或雙波長(zhǎng)檢測(cè)。所謂的“單波長(zhǎng)”就是使用一種對(duì)顯色吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定;而“雙波長(zhǎng)”則除了用對(duì)顯色吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定外,同時(shí)用對(duì)特異顯色不敏感的波長(zhǎng)如630 nm進(jìn)行測(cè)定,酶標(biāo)儀打印出來(lái)的吸光度則為二者之差。630 nm波長(zhǎng)下得到的吸光度是非特異的,來(lái)自于板孑L上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此,在ELISA比色測(cè)定中,使用雙波長(zhǎng),且不必設(shè)空白孔。
       二、測(cè)定的吸光度范圍 通常,酶標(biāo)儀的吸光度測(cè)定范圍在。一2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定要求。因此,對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
       三、光學(xué)系統(tǒng) 酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測(cè),一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測(cè)定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道,每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何,均可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來(lái)。光學(xué)系統(tǒng)好的話,則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
       四、檢測(cè)速度 酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。檢測(cè)速度快,有利于提高檢測(cè)的精密度,即避免由于測(cè)定過(guò)程中,因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。
       五、震板功能 酶標(biāo)儀的震板功能是指酶標(biāo)儀在對(duì)ELISA板孔進(jìn)行比色測(cè)定前對(duì)其進(jìn)行振蕩混勻,使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的酶標(biāo)儀均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié),使用有震板功能的酶標(biāo)儀,在進(jìn)行ELISA測(cè)定顯色反應(yīng)完成加入終止劑后,可不必振蕩混勻,直接放人酶標(biāo)儀上測(cè)定即可。
       六、溫育功能 溫育功能是指酶標(biāo)儀本身能按要求自動(dòng)準(zhǔn)確地控制儀器內(nèi)部的溫度,使得ELISA測(cè)定中微孔板條的溫育過(guò)程可在儀器內(nèi)部完成,而無(wú)需再外配溫箱。溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個(gè)附加功能,是否具有并不能說(shuō)明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實(shí)驗(yàn)室是否選擇,則可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的條件及需要來(lái)決定。
       七、軟件功能 軟件功能是指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其他測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。軟件功能是酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大,則軟件就成為判定酶標(biāo)儀優(yōu)劣的惟一指標(biāo)。此外,酶標(biāo)儀兼做酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、凝集反應(yīng)測(cè)定所需的軟件是否應(yīng)具備,當(dāng)然也應(yīng)根據(jù)使用目的而定。由于此類軟件一般都較為昂貴,酶標(biāo)儀常另外單獨(dú)按需配備,如果不是實(shí)驗(yàn)室特殊需要,就不必強(qiáng)求這種軟件功能。
       八、語(yǔ)言界面 通常進(jìn)口的酶標(biāo)儀人機(jī)對(duì)話多采用英文。這對(duì)于某些基層實(shí)驗(yàn)室可能會(huì)存在語(yǔ)言方面的困難,從而難以地發(fā)揮酶標(biāo)儀的作用。
       綜上所述,盡管酶標(biāo)儀的發(fā)展極為快速,種類繁多,功能也不斷加強(qiáng),但其根本的功用是不變的,即比色測(cè)定。大凡比色測(cè)定,其基本要求就是在一定吸光度范圍內(nèi)要有好的測(cè)定準(zhǔn)確性、線性和精密性。同樣的吸光度范圍,測(cè)定的準(zhǔn)確性、線性和精密性越好則酶標(biāo)儀亦越佳。
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