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    什么是ctDNA、cfDNA,要怎么提取這些核酸
    加入時間:2021-01-19 14:37:07  當(dāng)前新聞點擊率:2316

    核酸提取在與分子生物學(xué)有關(guān)行業(yè)里來說是基礎(chǔ)的操作,一般提取的核酸包括常規(guī)DNA、RNA提取外還包括:ctDNA、cfDNA、微小RNA(miRNA)等特殊靶樣本的提取。DNA、RNA大家都聽說的比較多,對ctDNA、cfDNA卻不怎么知道,醫(yī)療器械廠家小編就給大家介紹一下什么是ctDNA、cfDNA,要怎么提取這些核酸嗎?

    ctDNA也就是循環(huán)腫瘤細(xì)胞DNA,是指在血液中可能存在少部分腫瘤細(xì)胞壞死分泌的DNA片段,我們細(xì)胞內(nèi)的DNA并不是都呆在我們的細(xì)胞核內(nèi),這些DNA也會游離到血液中來,這些在血液中的DNA就被我們稱之為cfDNA,但是正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞是不一樣的,我們把來自于腫瘤的cf DNA用另一個名次替代,那就是ctDNA。

    miRNA是長度在21-23個核苷酸之間的單鏈RNA片段,調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。miRNA由基因編碼,從DNA轉(zhuǎn)錄而來,在細(xì)胞分化,生物發(fā)育及疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮巨大作用。

    核酸提取儀

    從樣品中提取核酸的方法有很多種,其中,磁珠分離法是目前應(yīng)用廣廣泛、運用于自動化處理系統(tǒng)中成熟的一種方法。由于ctDNA、cfDNA在外周血中含量極低,因此對于提取、檢測技術(shù)有很高的要求。目前ctDNA、cfDNA的檢測主要包括分離富集和檢測。富集方法包括梯度密度離心法、過濾法和磁珠法核酸提取儀(常用),檢測方法包括免疫學(xué)相關(guān)技術(shù)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶連鎖反應(yīng)技術(shù)、酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)以及芯片技術(shù)。提取miRNA的主要方法有:差速離心法、超濾法和免疫親和層析法,各有優(yōu)缺點,采用多種方法聯(lián)合應(yīng)用分離提取miRNA,可提高產(chǎn)物純度,穩(wěn)定生物活性。

    核酸提取,作為核酸檢測基本步驟的首要環(huán)節(jié),在臨床分子診斷中具有極其重要的地位,核酸的種類眾多,不同的核酸適用于不同的提取方法,能否獲得高質(zhì)量的核酸是后續(xù)檢測的關(guān)鍵,隨著醫(yī)學(xué)研究的不斷發(fā)展,臨床分子診斷衍生出不同應(yīng)用場景和檢測需求,對于核酸提取的要求也不盡相同,推動了核酸提取技術(shù)的進一步發(fā)展。

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