酶標(biāo)儀在用單波長測定吸光度時，除受到測定內(nèi)源性干擾（包括噪音、漂移、電壓等）因素外，受液體表面張力的影響也很大。在檢測過程中，由于液面表面張力的作用，液體的表面不是一個平面，而是形成一個凹面，從側(cè)面看似凹透鏡，這樣不可避免會影響光路的正常通過。由于凹液面的影響，光線在通過液面時，除正常的被液體吸收一部分外，尚有部分被折射和反射（如光線通過凹透鏡那樣），影響吸光度的檢測。而酶標(biāo)儀使用的又是通過光導(dǎo)纖維傳播的點光源，如果每次能在同一部位檢測，吸光度的重復(fù)性將得到保證，但由于機械運動等造成的誤差，不可能保證每孔都在相同部分被檢測，因此造成了孔與孔之間有一定的差異。

       在雙波長測定中，減少了測定干擾和電路干擾，因此測定結(jié)果明顯好轉(zhuǎn)。由于液體表面張力的不同，導(dǎo)致單波長測定時誤差較大。并且用不同的洗滌劑會影響到最后加入底物和終止液后的液面情況，搜集整理用加入表面活性劑的洗滌劑清洗后，形成的液面更凹，對單波長檢測的影響更大，并且與表面活性劑的濃度成正比。而用中性蒸餾水洗滌后，單、雙波長檢測技術(shù)結(jié)果基本一致。

        在酶聯(lián)免疫法測定抗原、抗體中，常用標(biāo)記酶辣根過氧化物酶所使用的底物一般是鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺，顯色終止后，二者在630nm和655nm處的吸光度值都只在吸收峰處（492nm/450nm）吸光度值的1%以下，因此，利用雙波長檢測，不會影響檢測的靈敏度。建議在進行酶聯(lián)免疫檢測時，酶標(biāo)儀比色應(yīng)該首先雙波長。這樣可以提高臨界值處標(biāo)本的分析準(zhǔn)度，減少實驗誤差。---體外診斷試劑生產(chǎn)廠家，普朗醫(yī)療網(wǎng)編發(fā)表！轉(zhuǎn)載時請保留鏈接，謝謝合作！