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酶標儀通道差與孔間差檢測問題剖析
酶標儀通道差與孔間差檢測問題剖析
加入時間：2012-08-15 14:42:56 當前新聞點擊率：5960
酶標儀通道差與孔間差檢測問題剖析，具體內容如下所示：
一、酶標儀通道差檢測：取一只酶標板（酶標板是通過洗板機來清洗的，一般是輔助酶標儀使用實現(xiàn)蛋白含量測定的醫(yī)療器械）小孔杯（杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染）以酶標板架作載體，分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液 200 ul先后置于8個通道的相應位置，蒸餾水調零，采用雙波長（測定波長490nm，參比波長630或650nm，以下均相同）連續(xù)測三次，觀察其不同通道之間測量結果的一致性可用極差值來表示其通道差。
為了提高酶標儀的檢測速度，根據(jù) 96孔酶標板的規(guī)格特點，目前大多數(shù)廠家的中、高檔酶標儀均采用8通道的檢測器（部分中、低檔酶標儀目前仍采用單通道）。因而它們每個通道的檢測能力是不盡相同的，它是儀器內部的固有誤差，與所測溶液濃度成正相關（不同檢測器對不同濃度溶液的響應能力不同），所以通道差是衡量酶標儀性能良好與否的重要指標之一；其衡量指標用極差表示，這與廠家推薦的指標是一致的；極差值越接近于零，通道差越小，說明同一樣品于不同通道檢測結果的一致性越好。
二、酶標儀孔間差的測量：選擇同一廠家、同一批號酶標板條（8條共96 孔）分別加入200 ul甲基橙溶液（吸光度調至0.065～ 0.070 A）先后置于同一通道，蒸餾水調零，采用雙波長檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。
由于不同廠家、不同批號酶標板之間的質量差異，導致孔與孔之間的檢測結果也不完全一致，這與水平光路光度計的比色皿質量是否符合要求一樣，因此我們認為孔間差是酶標儀外部的固有誤差，只有準確測知孔間差，并對結果作出相應的校正，才能使檢驗結果更符合實際情況、更準確可靠；采用的評價指標（士1.96 s）也是有利于結果校正的。另外，在設計孔間差測量的操作方法上，我們將200 ul甲基橙溶液吸光度調至 0.065～0.070 A，是充分考慮到加樣器的誤差，其目的是使加樣誤差控制在酶標儀的分辨率（0.01 A）以下，這樣也就避免了孔間差結果不因加樣誤差而導致假性增高。
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