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    多功能酶標(biāo)儀選擇五要素匯總
    加入時(shí)間:2011-11-15 08:30:30  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:5373

    普朗醫(yī)療器械公司資訊---最近幾年,隨著多功能酶標(biāo)儀在國(guó)內(nèi)各高校實(shí)驗(yàn)室逐漸推廣開(kāi)來(lái),多功能酶標(biāo)儀品牌和型號(hào)也逐漸多了起來(lái),亂花漸欲迷人眼。各品牌都有各自的一個(gè)甚至多個(gè)系列產(chǎn)品線,特性各不相同,選購(gòu)時(shí)各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標(biāo)令人眼花繚亂。 那么我們應(yīng)該怎么樣選取酶標(biāo)儀呢?下面普朗醫(yī)療器械公司將從用戶使用的角度,探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的多功能酶標(biāo)儀。

     
       一.濾片Vs光柵

    多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多,但最簡(jiǎn)單的莫過(guò)于用他們的濾光方式來(lái)作分界線。

    一般來(lái)說(shuō),酶標(biāo)儀可以分為濾光片型和光柵型兩大類。當(dāng)然也有一些型號(hào),例如Synergy4和EnVision等在一臺(tái)機(jī)器里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè),還是想用光柵的時(shí)候用光柵,該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可,另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
    總體來(lái)說(shuō),濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。目前常規(guī)多功能酶標(biāo)儀中最高的檢測(cè)靈敏度就是用濾光片型做出來(lái)的,例如TECAN Infinite F500的熒光檢測(cè)的靈敏度可以達(dá)到0.04 fmol/孔(熒光素,384孔/80ul)。
    但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長(zhǎng)和數(shù)量限制,不可能滿足日益增加的實(shí)驗(yàn)類型的檢測(cè)需要,而且有時(shí)需要對(duì)物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究,所以后來(lái)就誕生了光柵型的儀器。
    其光柵習(xí)慣上稱為單光柵。由于光純度的不足,在光柵的后面又加入了一組帶阻濾片,對(duì)雜光進(jìn)行二次過(guò)濾,達(dá)到了5×10-4的雜光率,基本與純粹的濾光片系統(tǒng)一致。后來(lái)TECAN又發(fā)展出了雙光柵技術(shù),通過(guò)兩次光柵濾光,雜光率降到了10-6。后來(lái),Thermo、BioTek和PE的部分新款儀器等都使用了類似雙光柵技術(shù)。由于激發(fā)和發(fā)射各用了一組雙光柵,此類機(jī)器又被稱為四光柵型多功能酶標(biāo)儀。
    光柵型酶標(biāo)儀的推陳出新,使得用戶在波長(zhǎng)選擇上不再受限,而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。
        二.雜光率&波長(zhǎng)準(zhǔn)確性

    光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,多家醫(yī)療器械廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,最關(guān)鍵的無(wú)疑就是光柵的雜光率和波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性了。

    雜光率指得就是光源通過(guò)光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長(zhǎng)的光占所標(biāo)稱波長(zhǎng)的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無(wú)論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來(lái)說(shuō),濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會(huì)直接進(jìn)入最后的檢測(cè)器,所以有多少的雜光就會(huì)引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測(cè)過(guò)程中,由于檢測(cè)器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級(jí)放大。因此,雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。
    光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測(cè)是依賴于物質(zhì)在某個(gè)波長(zhǎng)的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測(cè)定,實(shí)際檢測(cè)波長(zhǎng)偏離260nm幾個(gè)nm以上的話,OD值與最終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會(huì)發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長(zhǎng)選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長(zhǎng)偏離過(guò)大有時(shí)就會(huì)影響到最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    這兩個(gè)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測(cè)量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的最基本要求。
     
       三.認(rèn)證>參數(shù)

    在保證檢測(cè)可靠的基礎(chǔ)上,不同儀器的下一個(gè)差異就體現(xiàn)在檢測(cè)的靈敏度上面,這時(shí)人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測(cè)到多弱的信號(hào)。

    靈敏度涉及了整個(gè)光路系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和選料,很難說(shuō)某一個(gè)部件會(huì)起決定性作用。但是有一點(diǎn),在各種單功能檢測(cè)項(xiàng)目中,光吸收檢測(cè)用非放大型的光電二極管、熒光檢測(cè)用光電倍增管、發(fā)光檢測(cè)用專門(mén)設(shè)計(jì)的單光子計(jì)數(shù)光電倍增管,這三種不同的檢測(cè)器是各自檢測(cè)領(lǐng)域的優(yōu)先選擇。
    各單項(xiàng)檢測(cè)的最優(yōu)結(jié)果都是用相應(yīng)檢測(cè)器完成的。當(dāng)然也有的儀器出于成本等考慮,用一個(gè)檢測(cè)器兼容多種檢測(cè)模式,這在一定程度上也能完成實(shí)驗(yàn)需求,但是在性能上也會(huì)有所犧牲折中,無(wú)法實(shí)現(xiàn)各項(xiàng)檢測(cè)都達(dá)到最優(yōu)化。
    關(guān)于靈敏度的定義和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),每個(gè)醫(yī)療器械廠家都有各自的描述,都會(huì)說(shuō)自己是怎樣怎樣好,很難有一個(gè)直觀的客觀比較。因此,某些試劑廠家就站了出來(lái),對(duì)某些儀器的檢測(cè)性能提供一個(gè)第三方的認(rèn)證。
    比較常見(jiàn)的是發(fā)光檢測(cè)領(lǐng)域里面的Promega公司DLReady認(rèn)證,熒光檢測(cè)領(lǐng)域的Invitrogen公司的LanthaScreen系列認(rèn)證、Cisbio公司的HTRF認(rèn)證、BellBrook實(shí)驗(yàn)室的Transcreener認(rèn)證等等。這些認(rèn)證主要是針對(duì)公司提供的某一類型的要求較高的診斷試劑盒,涵蓋了對(duì)檢測(cè)儀器的各種性能要求,包括:檢測(cè)方法是否能用,靈敏度、線性范圍、孔間干擾等是否滿足要求等等。
    光柵型的儀器由于新技術(shù)近幾年才逐漸興起,受限于技術(shù)研發(fā)和儀器成本,同一個(gè)價(jià)格范圍內(nèi)的靈敏度等指標(biāo)會(huì)略差于發(fā)展成熟的濾光片機(jī)器。所以,在中檔多功能酶標(biāo)儀領(lǐng)域,拿到了各種認(rèn)證的光柵型儀器并不多見(jiàn)。

    這說(shuō)明了光柵型酶標(biāo)儀的研發(fā)又進(jìn)入了一個(gè)新的高度,除了在靈活性上取得了無(wú)可替代的作用外,還在檢測(cè)靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型是科研領(lǐng)域多功能酶標(biāo)儀的未來(lái)主要發(fā)展趨勢(shì);而濾光片型儀器也正在往單項(xiàng)性能更優(yōu)的方面改進(jìn)。
     
       四.比色杯+微量檢測(cè)

    除了常規(guī)的6~384/1536孔酶標(biāo)板檢測(cè)之外,有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測(cè)板等的兼容功能。無(wú)論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測(cè)板,其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測(cè)引入一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測(cè)也能通過(guò)光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程O(píng)D值的換算,但這只是一個(gè)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過(guò)程,檢測(cè)誤差累積較多,實(shí)際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測(cè)板后,光吸收的檢測(cè)光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)度,OD值換算更加簡(jiǎn)單和準(zhǔn)確。附帶了此類檢測(cè)功能的酶標(biāo)儀,相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測(cè)之外,還能替代部分分光光度計(jì)的功能,使其功能更加全面,儀器的性價(jià)比更高。

      五.品牌與售后

    不同品牌的儀器往往性能側(cè)重點(diǎn)有所不用。無(wú)論是一臺(tái)多好的酶標(biāo)儀,脫離了良好的售后服務(wù)體系也是難以正常運(yùn)作的。今年,各家醫(yī)療器械公司都在中國(guó)國(guó)內(nèi)設(shè)立了辦事處甚至亞太區(qū)總部,有些產(chǎn)品還專門(mén)研發(fā)了中文版的軟件和說(shuō)明書(shū)。這都說(shuō)明了廠家對(duì)中國(guó)市場(chǎng)的重視。而正因?yàn)檫@種重視,無(wú)論是廠家直銷還是選擇代理分銷,都會(huì)對(duì)國(guó)內(nèi)的售后服務(wù)提出各自的要求和期望,最基本的就是普及儀器的應(yīng)用工程師和維修工程師網(wǎng)絡(luò)體系。

    可以說(shuō),國(guó)內(nèi)的各大城市里面,基本已經(jīng)做到了部分品牌總有一個(gè)工程師在你身邊。選購(gòu)之前多與工程師交流,充分了解各家的性能特長(zhǎng)和售后情況,反復(fù)對(duì)比,總能找到最適合自己需要的一款多功能酶標(biāo)儀。
    聲明:本文由酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家普朗醫(yī)療網(wǎng)編發(fā)表(http://www.gevinwu-toro.com)轉(zhuǎn)載時(shí)請(qǐng)注明鏈接來(lái)源!
     

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