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    熒光酶標(biāo)儀與光吸收酶標(biāo)儀原理的區(qū)別在哪里呢?
    加入時間:2012-08-30 08:52:35  當(dāng)前新聞點擊率:6836
    酶標(biāo)儀是構(gòu)成酶免檢驗工作站的其中一種醫(yī)療器械,還有一個比較重要的設(shè)備是洗板機,酶標(biāo)儀有熒光酶標(biāo)儀和光吸收酶標(biāo)儀之分,那么熒光酶標(biāo)儀原理與光吸收酶標(biāo)儀原理有什么區(qū)別呢?具體內(nèi)容如下所示:
    熒光酶標(biāo)儀原理
    由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當(dāng)測繪熒光發(fā)射光譜時,將激發(fā)光單色器的光柵,固定在最適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長處,而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
    當(dāng)測繪熒光激發(fā)光譜時,將熒光單色器的光柵固定在最適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL處,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動,將各波長的激發(fā)光的強度訊號輸出至記錄儀,所記錄的光譜即激發(fā)。
    當(dāng)進行樣品溶液的定量分析時,將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處,將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長處,由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。
    光吸收酶標(biāo)儀原理
    光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光, 400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物吸光值。
    光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
    檢測單位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關(guān)系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。
      OD值由下述公式計算:
      E=OD=C×D×E
      C為檢測物的濃度
      D為檢測物的厚度
      E為摩爾因子
    在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波長。
    但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,檢測物光的吸收最小。酶標(biāo)儀檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
     
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