普朗醫(yī)療器械公司資訊 近年來，如何利用血液細胞分析儀準確計數外周血中的血小板，已成為血液學和檢驗醫(yī)學界的熱門話題。

    為什么精確計數血小板如此的重要呢？其原因有二：一是臨床上需要輸血小板者日益增多，僅在美國，每年輸血小板 就達700多萬單位以上。由于輸注血小板價格高昂，且易發(fā)生免疫性輸血反應和存在感染的風險，故英、美等國，近年來紛紛提出降低輸血小板的起點 （triggerpoint）或門（threshold），由過去的20×109 /L降至10×109 /L，甚至5×109 /L，因此迫切要求準確計數血小板。二是迄今為止，所有計數血小板的方法，對于血小板減少的標本，其準確性都比較差，亟需研究改進。

    準確計數血小板實非易事。血小板體積小、無色、易粘附。通過血細胞分析儀檢測，當血液自血管破損處流出時，血小板一經與破損的血管內皮細胞及組織成分接觸，立即以極快的速度粘附 于破損的血管壁。因此，無論用何種方法采血，所數得血小板數，均較血中實際血小板數為低，皮膚穿刺采血比靜脈穿刺更低。此外，血小板易發(fā)生聚集，通常我們 在血涂片或骨髓涂片上所見到的血小板，很多是幾個聚集在一起的，制片耽擱時間越長，聚集越多。更重要的是，目前所有的血小板計數方法，都存在不少缺陷。

    世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的血小計數方法，有人稱它為國際參考方（下稱參考方），是用Ig/dl的草酸銨溶液作溶血-稀釋劑，在相差顯微鏡下，用血細胞 計數板肉眼計數。和一切手工計數法一樣，該法除了細胞在計數板上散布的天然誤差之外，最大的缺點是計數的血小板太少。例如，一個重度血小板減少的患者，如 果血小板計數為10×109 /L，實際上在鏡下只數到10個血小板，復性很差。據Harrison稱，這一方法在不同的操作者之間的變異系統（CV）可達10%-25%。自動化的血液分析儀，無論是阻抗法還是光散射法，對于血小板數及形態(tài)正常的標本，結果一般比較可靠，但對于血小板明顯減少和/或形態(tài)異常者，所得結果誤差甚大，有時 甚至難以計數。其原因是：這些方法基本上都是依據細胞的近似血小板的所謂“非血小板顆粒”（nonplatelet particles,簡稱NPPs），如小紅細胞、紅細胞碎片、白細胞碎片、細菌和真菌以及免疫復合物等，會被當作血小板加以計數，從而使血小板數假性增 多。Hammerstrom在一例急性髓細胞白血?。∕5型）合并DIC患者的外周血片中，發(fā)現大量大小近似血小板的小體。經用細胞化學染色、免疫組化染 色等多種方法鑒別，發(fā)現其中約1/3與白細胞反應相同；繼用抗血小板抗體作免疫組化染色，僅4%呈陽性。證明這種物體，大多數是白細胞或紅細胞碎片而非血 小板。另一方面，正常人血小板體積相差甚大，可自2fL至 20fL以上。其體積分布直方圖不是對稱的，而是明顯地向右延伸，即都存在一定數量的大血小板。在病理情況下，如原發(fā)性血小板減少性紫癜、急性心肌梗塞、 糖尿病等，大血小板會增多。由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細胞等分開（只能提示可能有大血小板存在），致使許多大血小板被當作紅細胞而未計入 血小板總數中，從而使血小板計數結果偏低。

    由此可見，要想在日常用的血液分析儀上，用一般方法，達到準確計數血小板是不可能的，必須另辟蹊徑。

    目前已報道的準確計數血小板的方法，大體上有兩大類。一是免疫學方法，即用熒光標記的抗血小板抗體，特異地著染血小板，在流式細胞儀（FMC）或特定的血液細胞分析儀上計數血小板。二是用二維激光散射（two-dimensinal laser light scatter）測定法，將血小板與NPPs分開，達到準確計數。

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