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怎樣避免生化自動分析儀項(xiàng)目間試劑的交叉污染
怎樣避免生化自動分析儀項(xiàng)目間試劑的交叉污染
加入時(shí)間:2011-12-28 08:50:22 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:5002
很多類型的全自動生化分析儀因其清洗系統(tǒng)的工作模式所致,一個(gè)項(xiàng)目對緊隨其后的一個(gè)甚至幾個(gè)項(xiàng)目的測定會帶來一定程度的試劑污染,并且隨著儀器使用時(shí)間的累加,儀器狀況的下降,試劑交叉污染的程度會有所加劇。在實(shí)際工作中主要表現(xiàn)為某一項(xiàng)目的測定結(jié)果一直符合臨床要求,可是一段時(shí)間以后測定結(jié)果趨高,并且日益明顯;而單獨(dú)測定該項(xiàng)目時(shí)測值又合理起來,給日常工作帶來極大的不便。因此避免試劑間的干擾,變的非常重要。試劑間的干擾有兩個(gè)的原因:一是試劑中含有下一個(gè)測試所要測定的底物,或是含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用,因而直接干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果;另一個(gè)則是該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來了間接的干擾,因?yàn)樵谟性噭┪廴镜那闆r下,下一項(xiàng)目所測定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。下面通過對試劑成分的分析和相應(yīng)試驗(yàn)來找出試劑交叉污染可能帶來的情況,進(jìn)而指導(dǎo)相應(yīng)的項(xiàng)目調(diào)整和結(jié)果分析。 1、試劑間可能發(fā)生的干擾情況 1-1 ALT(IFCC)、AST(IFCC)試劑中含有高活力LD成分,有可能會對LD的測定帶來干擾。 1-2 ALP(IFCC)、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)、CO2(PEPC)、α-Amy(EPS)等試劑中使用磷酸緩沖液,可能會對其后的Mg2+ 測定帶來干擾。 1-3 ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、α-HBDH(DGKC)等試劑使用磷酸緩沖液,可能會對無機(jī)磷的測定帶來干擾。 1-4 CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)試劑中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反應(yīng)過程,因此可能對Glu測定帶來干擾,尤其對Glu的HK法測定可能帶來嚴(yán)重干擾。 1-5 Mg2+試劑 (Calmagite)中含有EGTA成分,為Ca2+絡(luò)合劑,可能對Ca2+的測定帶來干擾。 1-6 個(gè)別試劑以甘油做酶的保護(hù)劑,因此可能對TG的測定帶來干擾,等等。 2、干擾的排查和發(fā)現(xiàn) 事實(shí)上各個(gè)公司所提供的產(chǎn)品說明書常不能夠全面反映試劑組成的情況,因此通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來的干擾變得相當(dāng)重要。下面以兩個(gè)試驗(yàn)來加以說明。 2-1 將某一試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測定,考察結(jié)果的情況,進(jìn)而確定發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成直接干擾的項(xiàng)目。 2-2 1份樣本分為兩份,一份加生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)南♂屢?,另一份加等量的試劑,同時(shí)測定、考察結(jié)果的變化,進(jìn)而確定可能發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成干擾的項(xiàng)目。進(jìn)行這一實(shí)驗(yàn)時(shí),使用半自動生化分析儀可能會得到更為理想的結(jié)果,尤其是針對雙試劑反應(yīng)時(shí),R1、R2加入時(shí)機(jī)可以得到更為精確的控制。 此外,由于試劑成分的復(fù)雜多樣性,實(shí)時(shí)儀器狀況的獨(dú)特性,可能發(fā)生的試劑間的交叉污染的情況不盡相同。 3、干擾的避免 試劑間的嚴(yán)重干擾會極大的影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,因此隔絕二者間的聯(lián)系非常必要。一般在安排項(xiàng)目順序時(shí)要求兩個(gè)項(xiàng)目間至少要有一個(gè)非干擾項(xiàng)目,而最徹底的做法則是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前,以消除干擾發(fā)生的可能。同時(shí)要求檢驗(yàn)人員對儀器的工作狀態(tài)要了如指掌,并在一個(gè)樣本的項(xiàng)目選擇或一個(gè)樣本的最后一項(xiàng)與下一樣本的第一個(gè)項(xiàng)目選擇時(shí)對于試劑交叉污染的可能性加以考慮,合理安排項(xiàng)目順序,以便得到更為合理的結(jié)果。 通常情況下可以按照以下順序安排項(xiàng)目:ALT、AST、 ALP、γ–GT、ChE、TP、 Alb、TBIL、 DBIL、Urea、UA、Cr、CK、CK-MB、α–HBDH 、LD、 Glu 、TG 、TC、 HDL-C、 LDL-C、αpoAI、αpoB、 α–Amy 、CO2、P3-、 Fe3+ Ca2+、Mg2+。 實(shí)際工作中,用全自動生化分析儀進(jìn)行連續(xù)的多個(gè)項(xiàng)目的測定,每個(gè)反應(yīng)的詳細(xì)過程難以探知,因此理論分析結(jié)合實(shí)際應(yīng)用可以摸索出一套符合本單位工作的方法。
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